AEEA-AEEA

Šis junginys abiejuose galuose turi amino grupę ir karboksilo grupę, todėl jis yra idealus heterobifunkcinis kryžminis jungiklis. Šis dizainas turi nepakeičiamą vertę ADC, PROTAC ir baltymų ženklinimui.
Heterobifunkcinio kryžminimo privalumai: Palyginti su homobifunkciniais kryžminiais jungikliais (su tomis pačiomis funkcinėmis grupėmis abiejuose galuose), heterobifunkcinis dizainas leidžia laipsniškai ir kryptingai sujungti dvi skirtingas molekules, išvengiant multimerų ar ciklizacijos produktų susidarymo. Konkrečiai šiai molekulei: Pirma, karboksilo grupė (aktyvuota per NHS arba HATU) gali reaguoti su molekule (pvz., lizino liekana ant antikūno), sudarydama amido jungtį; tada amino apsauga (jei ji iš anksto apsaugota) pašalinama ir ji reaguoja su antrąja molekule (pvz., karboksilo grupe ant vaisto arba fluorescencinio zondo). Šis nuoseklus sujungimas leidžia tiksliai valdyti 1:1 jungtį, o išeiga paprastai yra didesnė nei 70%.
Tipiški taikymo scenarijai: ① ADC konstrukcija: prijunkite aktyvuotas karboksilo grupes prie antikūnų paviršiaus (per liziną arba modifikuotą cisteiną), tada susiekite aminogrupes su karboksilo arba karbonato grupėmis ant vaistų (pvz., MMAE, DM1). AEEA-AEEA tarnauja kaip tarpiklis, užtikrinantis tinkamą atstumą tarp antikūno ir vaisto. ② PROTAC sintezė: prie karboksilo galo pritvirtinkite E3 ubikvitino ligazės ligandą (pvz., VHL, CRBN ligandų), o prie amino galo prijunkite tikslinį baltymo ligandą, sudarydami PROTAC molekulę, kurios ilgis (maždaug 2,5 nm), kuris tiksliai skatina trijų komponentų komplekso susidarymą. ③ Paviršiaus imobilizavimas: pritvirtinkite karboksilo grupes prie amino-modifikuotų magnetinių granulių arba lustų paviršiaus, o amino galas naudojamas karboksilo- turinčioms biomolekulėms užfiksuoti. ④ Fluorescencinis žymėjimas: prijunkite karboksilo grupes prie antikūnų ir susiekite aminogrupes su fluorescencinių dažų (pvz., FITC, Cy5) NHS esteriu, kad paruoštumėte dvigubus{11}}žymėtus zondus.
Palyginimas su kitais jungikliais: palyginti su komerciniais heterobifunkciniais kryžminiais jungikliais, tokiais kaip Sulfo{0}}SMCC (su NHS esteriu ir maleimidu abiejuose galuose), šios molekulės PEG pagrindas užtikrina geresnį tirpumą vandenyje ir biologinį suderinamumą, išvengiant baltymų agregacijos, kurią sukelia hidrofobiniai kryžminiai jungikliai. Tuo pačiu metu dėl jo reguliuojamo ilgio (leidžiama prijungti kelis AEEA įrenginius) jis yra naudingesnis scenarijuose, kai reikia ilgesnių tarpiklių. Apibendrinant galima pasakyti, kad bifunkcinis galinių amino ir karboksilo grupių dizainas užtikrina didelį selektyvumą ir didelį nuoseklų ryšį, o tai yra pagrindinė šios molekulės, kaip jungties, vertė.